【摘 要】 皮膚外用制劑包括軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、貼劑、貼膏劑等，為臨床上的常用劑型之一，可避免首過效應，使用方便。流變學可描述產品的流動特性和力學性能，反映制劑的內部結構，已成為皮膚外用制劑的重要研究內容。流變學研究通常分為穩態流變學和動態流變學兩種，用于研究樣品的液體行為和固體行為。本文從兩種流變學方法出發，綜述了皮膚外用制劑的研究進展及常用的數據分析模型，以期為皮膚外用制劑的流變學研究提供參考。

        在藥物的臨床使用中，皮膚外用制劑作為常見的給藥類型，主要有軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、貼劑、貼膏劑等劑型。皮膚給藥具有諸多優勢，可避免藥物在口服給藥后受胃中酸性環境和胃腸道黏液的影響[1]；減少血藥濃度峰谷變化，從而降低藥物的不良反應；直接作用于靶部位發揮藥理作用；減少給藥次數，且患者可自主用藥，用藥依從性較高；在使用過程中，如發生不良反應，可隨時中斷給藥[2]。

        流變學主要是研究物質變形與流動的一門學科，美國物理化學家Bingham于 1928年正式提出“流變學”的概念，字頭取自古希臘哲學家Heraclitus所說的“πανταρετ”，意為萬物皆流[3]。變形是固體的主要性質之一，指對某一物體外加壓力后，其內部各部分的形狀和體積發生的變化。流動是液體和氣體的主要性質之一，其流動的難易程度與流體本身的黏性相關。流變學研究的主要對象是流體的流動行為、半固體的黏彈性以及固體的變形行為等。在藥學領域，可以應用流變學理論對皮膚外用制劑（如軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑等）的劑型設計、處方組成、工藝參數、質量控制、貯藏、使用、安全性、有效性等進行評價，并具有一定的指導作用[4-7]。例如，皮膚外用制劑的流變學性質會影響其從瓶狀或管狀容器中的擠出行為，產品在皮膚上的鋪展性和黏附性，以及藥物從基質中的釋放等，進而影響產品的有效性和安全性[5]。

        物質的黏彈性是流變學的主要研究內容，包括黏性和彈性。一般來說，樣品受到外力作用后發生緩慢變形，表現為黏性行為；在變形力消除后，樣品逐漸恢復至原有結構，表現出彈性行為。良好的黏性可以保證皮膚外用制劑與藥用部位的緊密貼合，確保制劑在使用過程中不會脫落，且不會輕易流動；良好的彈性可以使制劑具有更佳的儲存穩定性[8]。近年來，我國愈加重視皮膚外用制劑的流變學研究，國家藥品監督管理局最新頒布的《中華人民共和國藥典》（2020年版）四部中收錄了黏度的測定方法。此外，國家藥品監督管理局藥品審評中心于2018年7月1日頒布的《新注冊分類的皮膚外用仿制藥的技術評價要求（征求意見稿）》明確要求，需將皮膚外用制劑的流變特性作為制劑的關鍵質量屬性進行相應研究[9]。流變學性質研究方法主要分為穩態流變學研究和動態流變學研究，通過兩種方法的有機結合，可以充分剖析制劑的流變學性質。

        1、穩態流變學研究
        穩態測試是在恒定的剪切速率下，觀察黏度或應力隨時間的變化[10]。對樣品進行穩態流變學研究，可以獲得流變曲線、屈服應力、觸變性和蠕變性等流變學特征，這些參數均可作為制劑的關鍵質量屬性，指導制劑的開發。

       1.1 流變曲線
        流變曲線是指流體的剪切應力與剪切速率之間的關系曲線，可以通過公式η=τ/γ來描述，其中，τ為剪切應力；γ為剪切速率；η為黏度，可通過流變曲線的斜率獲得。根據流變曲線，可以得到流體的黏度隨剪切速率的變化。當流體受到剪切作用時，可以根據剪切應力隨剪切速率的變化趨勢來判斷流體的類型（如圖1所示），其中，隨著剪切速率的增大，牛頓流體的剪切應力呈線性增大，其黏度保持不變；假塑性流體的剪切應力逐漸減小，其黏度也隨之降低；脹塑性流體的剪切應力逐漸增大，其黏度也隨之升高[11]。

        皮膚外用制劑通常表現出非牛頓性，高剪切力的作用會導致黏度的降低，便于在皮膚表面的鋪展[12]，制劑的鋪展性直接與患者在使用過程中的直觀感受及治療順從性相關[13-14]。吳曉鸞等[15]使用錐板型流變儀測定了鹽酸金霉素眼膏的流變曲線，發現眼膏劑的黏度隨剪切速率的增加而顯著減小，表明此產品為剪切變稀的假塑性非牛頓流體。Xie等[16]研究了丹皮酚凝膠的流變學性質，發現其黏度隨剪切速率的增加而減小，為剪切變稀的非牛頓假塑性流體，這種性質有利于凝膠在鼻腔的剪切作用下保持低黏度狀態，增加流動性，從而使凝膠到達更深的嗅覺區，更好地發揮藥效。另外，采用合適的數學模型對流變曲線進行擬合，可得到制劑的屈服應力、零剪切黏度、無限剪切黏度等參數，進一步表征流變行為。

        1.2 屈服應力
        屈服應力是表征樣品開始流動或停止流動的臨界應力，可用于評估皮膚外用制劑在使用過程中的鋪展性以及產品灌裝時的易實現性[17]。反映屈服應力的數值為屈服值，它在微觀上反映粒子在三維網狀結構中的相互作用力[18-20]。Kamal等[21]研究了睪酮透皮凝膠處方對屈服應力的影響，研究發現卡波姆用量增加會導致用于中和的羧基和鈉離子的比率增加，并形成卡波姆間隙，卡波姆的溶脹作用使間隙彼此壓緊，使得處于間隙之間部分的剛性逐漸增強，導致凝膠屈服應力的增大；氫氧化鈉含量升高，會引發滲透壓的不平衡和較強的靜電相互作用，這兩種作用均會使得卡波姆間隙相互擠壓，導致屈服應力增大。Futamura等[22]研究了羥丙基甲基纖維素（HPMC）對石蠟油乳液性質的影響，發現隨乳液中HPMC濃度的升高，屈服應力逐漸增大。屈服應力較高時，在一定的剪切力作用下，乳滴不易朝剪切流動方向移動，且不易破裂，具有良好的穩定性。

        1.3 觸變性
        觸變性是指體系在攪動或其他機械作用下，分散體系的黏度或剪切應力隨時間變化的一種流變學現象[23]。對于乳膏等皮膚外用制劑，觸變性越大，表明樣品從半固體變為流體后，恢復成原狀態的能力越大，其阻止沉淀發生的能力越強，制劑就越穩定。一般來說，皮膚外用制劑在使用過程中會經受反復的擠壓操作，為保證制劑具有良好的物理穩定性，需通過觸變性來判斷微觀結構的恢復程度，從而保證其藥效[5]。因此，觸變性是皮膚外用制劑穩定性的重要評價指標。劉科等[24]發現有些分散體系的黏度隨剪切時間的延長而降低，靜止后又恢復，即具有時間因素的剪切變稀現象，稱為正觸變性。反之，如果分散體系的黏度隨剪切時間的延長而增加，即具有時間因素的剪切變稠現象，稱為負觸變性，或震凝性。觸變性可反映體系在一定外力下內部結構的變化，一般來說，正觸變性表明在外力作用下體系內某種結構的破壞速率大于其恢復速率，使得制劑在快速剪切時，黏度迅速降低，便于在患處的均勻涂抹；且在停止剪切后，制劑在短時間內即可恢復至原有黏度，利于制劑在用藥部位的長時間黏附，減少藥物的使用次數；而發生震凝效應時，體系內部形成了某種新的結構，此性質導致制劑在快速剪切時，黏度迅速增大，產生結塊現象，導致涂抹困難，難以達到預期的治療效果，降低患者的順應性[3]。陳麗梅等[25]發現不同冷卻速度制備的乳膏，其觸變性存在顯著差異；冷卻速率為2.25 ℃/min和1.74 ℃/min的乳膏呈正觸變性，而0.89 ℃/min和0.18 ℃/min的乳膏呈負觸變性，此種性質的乳膏更適用于皮膚外用。

        通常采用“振蕩-旋轉-振蕩”3段測試法測定樣品的觸變性，也稱為ORO測試，即第一步，使用線性黏彈區內的低應變值進行極低剪切的振蕩測試，以模擬靜態特性；第二步，使用高剪切速率進行強烈剪切的旋轉測試，以模擬使用期間樣品的結構分解；第三步，使用與第一步測量段相同的線性黏彈區的低應變值，以模擬靜態時的結構恢復[26]。在兩個進行振蕩的測量段中，使用相同的角頻率進行測試。在三段法測試觸變性的研究中，恢復后形成的體系結構與原體系可能不同，即在流變學曲線中表現為剪切速率上升和降低前后，曲線并不重合，形成觸變環，其面積越大，表明觸變性越大[27]。吳曉鸞等[28]研究了不同類型的眼用制劑，發現其均具有較強觸變性，表現為在低剪切時具有較高黏度，在高剪切時黏度較低，隨后恢復低剪切時，黏度也隨之恢復。這種流變學性質將有助于產品的使用，剛滴入眼睛時，眼瞼的快速剪切使產品的黏度降低，有利于制劑的充分涂布；當眼瞼停止剪切時，產品的黏度逐漸恢復，保證藥物的長時間停留，利于更好地發揮藥效。

        描述觸變性流體的流變行為時，可以選擇適當的本構模型。本構模型是表示流體本構關系的物理模型，本構關系可以將描述連續介質變形的參量與描述內力的參量相聯系，是流體宏觀力學性能的綜合反映。不同類型流體的觸變性可以不同的本構模型來描述：（1）對于無彈性、無屈服應力的流體，可用Moore模型、冪率模型和Cross模型來表征其觸變行為；（2）具有屈服應力流體的觸變行為可用Worrall-Tuliani模型、雙線性模型和冪率模型來表征其觸變行為；（3）對于同時具有黏彈性和觸變性行為的流體，可以采用結構網絡模型、Quemada模型來表征其觸變行為[29]。Razavi等[26]測定了Salep和Balangu樣品的剪切應力-剪切速率曲線，使用二階結構動力學模型、Weltman模型、一階應力衰減模型來描述觸變性，經擬合程度（R2）對比，最終選用具有非零穩態應力的一階應力衰減模型（R2>0.96），通過此模型可得到屈服應力、平衡應力等參數，以此進一步優化處方和制備方法。

        1.4 蠕變
        蠕變是指對物質附加一定應力時，其隨著時間變化表現為一定的伸展性或形變，是材料的緩慢變形[30]。只要所施加的應力與相應應變成一定的比例，黏彈性的相關理論——Boltzmann 疊加原理就可以應用于蠕變實驗中[31-33]。它是測試皮膚外用制劑黏彈性最為簡便的方法之一。皮膚外用制劑的蠕變曲線通常可分為3個區域：（1）瞬時彈性區域，代表一級結構鍵的彈性拉伸；（2）彎曲的黏彈性區，表示由于二級鍵的斷裂和重整以及黏性流動而產生的晶體或液滴的取向，所有鍵都不會以相同的速率斷裂和重整，并且將存在較寬范圍的延遲時間（即黏度與彈性之比）；（3）應力消除后，應變的響應稱為恢復曲線，瞬時彈性區域和黏彈性區域分別全部或部分恢復，黏性區域無法恢復[34]。

        樣品的“蠕變-恢復”特性測定分兩步完成，首先保持應力恒定，隨時間的變化，逐漸改變應變，這一步驟稱為蠕變；隨后將應力全部或部分解除，觀察已發生的應變隨時間的變化，這一步驟為恢復。“蠕變-恢復”測試可以反映低速下產品的黏彈性特征，零黏度應力測定可以反映產品的儲存穩定性和剪切后結構的可恢復性。其中，變形量越低，表明分散體系越穩定；如果樣品在短時間內表現出較大的形變，表明產品的彈性較好；在測定中的變形量較小，表明產品的穩定性更佳[35]。Eccleston 等[30]研究了不同處方的西托醇乳膏的蠕變性質，發現其蠕變行為差異較大，且不同貯存時間的各處方的蠕變行為也表現出較大差異，因此可將蠕變行為作為處方篩選的重要依據。Korhonen 等[33]研究了不同類型表面活性劑（如脫水山梨糖醇單酯、脫水山梨糖醇單月桂酸酯、單棕櫚酸酯、單硬脂酸酯和單油酸酯等）對乳膏性質的影響，測定了不同處方乳膏的流變性質，并使用 Burger 模型和 Maxwell 模型對蠕變測定結果進行分析，結果顯示表面活性劑的雙鍵結構可能會降低乳膏的彈性，且隨表面活性劑烷基鏈的增長和用量的增加，乳膏的彈性增加，其穩定性也更好。

        2、動態流變學研究
        穩態流變學測試中，其終點施加的應力往往已遠大于線性黏彈區所對應的應力，在此應力條件下，樣品結構會受到破壞或重排，而動態流變測試由于施加的應力較小，通常認為其對樣品不具有破壞性，而動態流變學主要評估在小幅度應力下樣品的黏彈性[36]。另外，對于具有顯著觸變性的流體，在進行流變學研究時，因其具有時間依賴性的剪切變稀或變稠行為，導致簡單的穩態剪切方法無法準確測定樣品在某一剪切速率下的動力黏度，就需要進行動態即振蕩剪切條件下的流變學性質研究[37]。

        動態流動分析是對樣品施加正弦剪切應變，研究樣品在交變外力或應力作用下的流變特性，主要測定流體的儲能模量 G′、損耗模量 G″與復數黏度 η*。模量與制劑的穩定性相關，Okuro 等[38]在選擇十六烷作為油相成分時，凝膠的彈性模量為3.0 ×106 Pa，黏性模量為3.0 ×105 Pa；而選擇中鏈甘油三酸酯作為油相成分時，凝膠的彈性模量為2.7 ×104 Pa，黏性模量為4.0 ×103 Pa，表明低極性的油相成分可以顯著提高凝膠的穩定性；同時發現低極性組分對凝膠的熱穩定有較大改善。陳倩倩等[23]研究了卡波姆980和981不同比例對雙唑泰凝膠的影響，發現隨卡波姆980比例的增加，凝膠的彈性模量和黏性模量均有較大提高，體系的穩定性大大增強。陳丹等[39]發現布洛芬乳膏的儲存模量和黏性模量均較大，在貯存期間，乳膏的內部膠網結構具有較大的抵抗外力而不發生形變的能力，可以長時間維持較高的彈性。吳曉鸞等[15]研究了卡波姆眼用凝膠劑的動態流變學性質，在低剪切時，凝膠的彈性模量大于黏性模量，即在靜止狀態時制劑不易流動；在高剪切時，凝膠的黏性模量大于彈性模量，即在使用過程中，制劑的黏附力更強，這兩種性質均保證了卡波姆凝膠劑的穩定性和藥效的發揮。

        復數黏度與很多高分子體系穩態剪切的動力黏度具有相關性，其定義為：η*=√（Gˊ/ω）2+(Gˊˊ/ω)2，其中ω為角頻率，復數黏度本身是線性行為，小振幅的振蕩剪切流動對流體中的結構僅有微小的擾動，沒有強剪切流動對結構造成的破壞，故復數黏度更能反應流體的流變性質[40]。

        在動態流變學研究中，當對樣品施加的應變或應力在一定范圍內時，樣品產生的形變能夠完全恢復，即其結構未受到破壞，此應變或應力區間為線性黏彈區；當應變或應力超出此范圍，樣品的結構就會發生相應變化[20]。通常，可以通過應力掃描確定樣品的線性黏彈區；選擇在線性黏彈區的應力，通過改變頻率或溫度，進行頻率掃描或溫度掃描，進一步剖析樣品的流變性質。

        2.1 應力掃描
        應力掃描是固定掃描頻率，使應變呈振幅逐漸改變的正弦變化（一般為由小到大的階梯式變化，常用0.01% ~ 100%），記錄應變與彈性模量或黏性模量的關系曲線，結果通常采用對數變化。

       對皮膚外用制劑進行應力掃描，可以得到的參數有：（1）樣品強度：即 Gˊ、G"的絕對值大小，以及二者的相對大小，代表了樣品的狀態（膠體還是流體）、強度（軟硬）；（2）線性黏彈區：通常選擇Gˊ函數的曲線計算線性黏彈區范圍[26]。在線性黏彈區內，儲能模量與損耗模量與應變無關，其僅與分子結構相關。具有較寬線性黏彈區域的樣品抵抗外部應力的能力越大，穩定性也越好；（3）屈服應力：應力掃描中，線性黏彈區邊界處的剪切應力為屈服應力；（4）流動點：當線性區內G′>G″時，在應變掃描的曲線上G′、G″通常會有一個交點，即流動點，流動點是損耗模量G″等于存儲模量G′時所對應的剪切應力，也是其固體結構開始流動時所需的臨界剪切應力[41]，當所施加的應力超過流動點時，樣品的微觀結構會發生不可逆的變形[42]；較大的流動點是樣品在更大程度上抵抗外部應力的標志，也是穩定性更好的標志[43]。Kamal等[21]發現睪酮透皮凝膠中乙醇的用量為30%時，凝膠的流動點為200%；乙醇含量為0.5%時，流動點為100%。屈服值隨乙醇含量的增加而增加，且當乙醇含量為30%時，凝膠的物理穩定性最佳。這些參數均可作為皮膚外用制劑的質量控制參數，用于指導處方和工藝參數的摸索。

        2.2 頻率掃描
        頻率掃描是應力呈固定振幅正弦變化（在線性區內），逐漸改變振蕩頻率（一般為由大到小的階梯式變化，常用100 ~ 0.1 rad/s），記錄頻率與模量的關系曲線，結果通常采用對數變化，可以反映樣品性質與時間尺度的關系。頻率掃描可以獲得制劑的G′、G″和損耗因子tanб （G″與 G′的比值）等參數。高頻率掃描段可以表征樣品在受到短時間（正弦波的振蕩周期短）應變或應力時的響應狀態，用來模擬皮膚外用制劑在使用過程中的擠出、涂抹等行為；低頻率掃描段可以表征樣品在受到長時間（正弦波的振蕩周期長）應變或應力時的響應狀態，用來模擬制劑在貯存過程（受到的剪切力較小）中的穩定性。頻率掃描可以指導制劑制備過程中工藝參數的篩選，如乳膏在制備過程中的均質轉速、均質時間等參數會對產品的G′、G″等產生較大影響，因此可以通過監控流變行為來調整工藝參數，以達到目前產品的高效開發和質量可控。

        吳曉鸞等[44]對普羅雌烯乳膏進行頻率掃描，結果顯示隨振蕩頻率的增大，彈性模量和黏性模量均逐漸增大。彈性模量一直大于黏性模量，說明普羅雌烯乳膏在靜置狀態下的性質穩定，便于貯存，且在較高剪切狀態下也較穩定。另外，復數黏度隨振蕩頻率的增大而下降，表明乳膏為剪切變稀的非牛頓流體。Chegini 等[45]對眼部注射用交聯黃芪酸水凝膠進行頻率掃描，發現彈性模量和黏性模量顯示出對頻率的依賴性，且隨頻率的增加呈現上升趨勢，但彈性模量在14 ~ 249 Pa 之間均高于黏性模量，損耗因子對頻率的增加均小于1，表明在線性區內，凝膠主要表現為彈性，整個系統表現為固體隨頻率變化顯示出可變的黏度特性。林國鋇等[46]研究了不同輔料對壓敏膠流變性能的影響。在壓敏膠中添加促滲透劑肉豆蔻酸異丙酯時，發現低頻率下的彈性模量和復數黏度降低，導致貼劑的持黏性降低；而在處方中添加抑晶劑共聚維酮S-630 時，發現低頻率下的彈性模量和復數黏度增高。因此，在貼劑的處方開發中，可以通過調整促滲透劑和抑晶劑，或者調整其他輔料，以達到期望的流變性質。

        2.3 溫度掃描
        溫度掃描是選擇在線性黏彈區范圍內的某個應變條件下，固定振蕩頻率，考察儲存模量、黏性模量和復數黏度隨實驗溫度的變化，有助于確定樣品在不同溫度下的流變學性質變化情況。如陰道用乳膏劑的開發過程中，需研究乳膏在陰道溫度和儲存溫度下的流變性質，以確保制劑在使用過程中的患者順應性和良好的儲存穩定性，此時可以通過溫度掃描判斷乳膏在較大溫度范圍內的流變性質變化，以用于指導制劑的開發。吳曉鸞等[44]進行溫度掃描后發現，普羅雌烯乳膏的G′、G″、η*等參數在溫度高于35 ℃時出現整體下降的趨勢，表明普羅雌烯乳膏在室溫條件下較穩定，而其性質、結構等在溫度較高時會發生變化，應該在室溫條件下儲存。王珊珊等[47]使用溫度掃描測定了雌二醇陰道用生物黏附性溫敏型凝膠的相轉變溫度，結果顯示凝膠的相轉變溫度為30.5 ℃；當溫度較低時，G″>G′，即凝膠呈自由流動的液體狀，而溫度較高時，G′>G″，即凝膠呈固體形態；此行為可使凝膠在給藥器具內具有良好的流動性，在陰道給藥時有利于凝膠的鋪展，作用一定時間后，凝膠可粘附在陰道內壁，持續發揮藥物作用。

        3、流變學數據分析方法
        3.1 數學模型
        在對物質的流變學特征進行測定后，可以使用數學模型對測定結果進行擬合，尋找與樣品的流變學特征相吻合的數學模型，計算出可以表征樣品流變學特征的關鍵參數。在穩態流變學研究中，目前常用的流變學數學模型有Power Low 模型、Bingham模型、Herschel-Bulkley模型和Carreau/Yasuda模型[48]。

        3.2 數學模型的選擇
        對流變學數據進行多種數學模型擬合后，一般通過擬合程度R2來選擇最適宜的數學模型。Zamani 等[49]在對蕁麻種子膠分散體的流變曲線數據進行不同種數學模型的擬合，發現Herschel-Bulkley 模型的R2在0.997 ~ 0.999之間，為最優選擇。Panea等[48]使用了Bingham、Casson、Ostwald-de Waele和 Herschel-Bulkley等模型對新型膠原蛋白-右旋糖酐-氧化鋅復合材料的流變學數據進行擬合，發現Herschel-Bulkley 模型的R2在0.9931 ~ 0.9976 之間，為最優選擇。Ghica等[50]蕁麻籽膠的流變學數據進行擬合，發現相比于Casson 和 Ostwald-de Waele模型，Herschel-Bulkley 模型的R2在0.997 ~ 0.999 之間，為最合適模型，并確定了模型中各參數的范圍。

        4、結論與展望
        在半固體制劑的研發過程中，表面活性劑種類和用量、制備過程中油相加入水相的速度、均質速度及其時間等均可能對流變學性質產生較明顯差異，因此測定不同流變學參數可以迅速和精準地反映皮膚外用制劑的內部行為，可作為制劑處方和制備工藝的有力區分工具。同時，流變學性質還可以指導制劑的穩定性，良好的流變性質可在較大程度上保證制劑具有較好的物理穩定性和貯存穩定性。

        目前，流變學研究主要集中應用于化工和食品領域，國內在藥學領域方面較少深入研究，但其已受到藥學界的廣泛關注，且愈發成為皮膚外用制劑研發過程中的關鍵參數。然而，制劑中處方和工藝對流變學性質的影響機制還未有較深入研究，且與其他關鍵質量屬性的聯系也尚未進行深入研究。因此，需要深入探究流變學性質的形成機制，研究其與制劑其他關鍵參數的相關性，通過詳細的風險評估及分析，進行合理的處方和工藝設計，從而實現產品流變學的“可設計化”。